RAD51B-EZH2 axis as a potential therapeutic target for TNBC through cell fate conversion.
研究背景
三阴性乳腺癌（TNBC）侵袭性强，缺乏有效分子靶点，治疗选择有限、预后差，其驱动机制不明。本研究用 Sleeping Beauty 转座子系统筛选候选驱动基因，聚焦 RAD51B 探讨其在 TNBC 发生中的作用。
方法速览
- 基因筛选: 用转座子系统筛选驱动基因，CRISPR-Cas9 技术验证 RAD51B 功能。
- 模型建立: 建立 Rad51b 敲除小鼠模型，结合报告系统评估 ERα 信号。
- 机制探究: 用多种方法检测组蛋白修饰和 PRC2 复合物富集；结合相关测定解析 RAD51B 缺失对信号通路的影响。
- 治疗验证: 用 EZH2 抑制剂和他莫昔芬进行治疗实验；用患者来源类器官模型验证联合治疗策略。
主要发现
- RAD51B 缺失促进 TNBC 形成并抑制 ERα 表达：敲除 Rad51b 增强细胞集落形成和肿瘤生长能力，降低 ERα 表达，增加 TNBC 亚型比例，且 RAD51B 与 ERα 在患者组织中呈正相关。
- RAD51B 缺失诱导 Esr1 启动子区域组蛋白 H3K27 三甲基化：RAD51B 缺失使大量基因表达下调，尤其是雌激素信号通路相关基因，增加 H3K27me3 水平，增强其在 Esr1 启动子区域的富集。
- RAD51B 缺失促进 PRC2 复合物在 Esr1 启动子区域的招募：虽不改变 PRC2 复合物核心组分水平，但增强其在 Esr1 启动子区域的富集，敲除相关基因可逆转 ERα 表达下调。
- RAD51B 缺失通过 AMPK 通路导致 EZH2 Thr311 去磷酸化：RAD51B 缺失使 ATP 水平升高，抑制 AMPK 通路，减少 EZH2 磷酸化，增强 PRC2 复合物活性。
- EZH2 抑制剂可恢复 ERα 表达并增强内分泌治疗敏感性：低剂量 EZH2 抑制剂可逆转 ERα 表达下调，联合他莫昔芬可抑制肿瘤生长，在细胞系和类器官模型中均有效。
总结展望
本研究揭示 RAD51B 缺失通过调控 PRC2 复合物和 H3K27me3 修饰抑制 ERα 表达，促进 TNBC 形成的机制，提出靶向 RAD51B-EZH2 轴的治疗策略。不过，研究存在 RAD51B 影响 ATP 水平机制不明、临床样本验证有限、联合治疗长期安全性待评估等局限。