Hybrid Extracellular Vesicles for Efficient Loading and Functional Delivery of mRNA.
研究背景
细胞外囊泡（EVs）是理想的递送载体，但高效装载并功能性递送mRNA仍是挑战。本研究提出低pH诱导EV与脂质纳米颗粒（LNPs）融合生成杂合细胞外囊泡（HEVs）的方法，解决EV装载大分子效率低问题。
方法速览
通过低pH诱导EV与LNP融合制备HEVs，用多种技术手段验证其物理特性及mRNA装载情况。还研究了其组成、优化制备参数，并评估细胞耐受性、mRNA递送能力与机制及体内分布。
主要发现
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HEVs成功装载mRNA并保留特性：平均粒径增大，有与EV相似球形结构，保留典型蛋白标记，约30%颗粒携带mRNA。
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揭示HEVs组成变化：组成独特，更接近EV，保留EV蛋白质，整合LNP功能性成分。
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优化参数提升装载效率：粒子浓度10¹¹ particles/mL时回收率和封装效率高，调节EV:LNP比例可调控mRNA装载量。
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体外耐受性良好：低、中剂量对细胞生长无明显影响，高剂量下部分HEV制剂耐受性优于LNP。
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体外实现功能性mRNA递送：能触发报告细胞表达，多种细胞系中表现出剂量依赖性。
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诱导内体逃逸实现递送：能诱导内体膜破裂，内体逃逸能力与递送效率相关，能力源于LNP成分。
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体内实现递送并组织特异性分布：在小鼠体内成功递送mRNA，脾脏表达水平最高，安全性好。
总结展望
本研究开发新型HEVs递送平台，实现mRNA高效装载与功能递送，结合了EV和LNP优势，揭示了递送机制。但存在纯化有挑战、体内递送效率低于LNP等局限，未来需优化纯化技术、调整制剂参数、深入解析靶向机制，推动临床转化。