Dehydrocostus Lactone Inhibits Microglia-Mediated Neuroinflammation by Targeting CYP2A6 to Improve Ischemic Brain Injury.
研究背景
缺血性脑卒中是重要健康问题，神经炎症在其发病机制中起关键作用，微胶质细胞是重要参与者。去氢木香内酯（DHC）有抗炎作用，但在缺血性脑卒中后神经炎症中的作用不明。
方法速览
研究采用细胞培养（原代微胶质细胞和BV2细胞）、药物处理（DHC和LPS），运用分子生物学技术（qRT - PCR、Western Blot、ELISA），进行行为学测试（mNSS评分等）、组织学检测（TTC染色、免疫荧光染色）、转录组测序及分子对接等方法。
主要发现
- DHC对微胶质细胞无毒性：CCK - 8和LDH检测显示，DHC在2.5、5和10 μM浓度下对BV2细胞无明显影响，免疫荧光染色也证实其对原代微胶质细胞无毒性，此浓度范围用于后续实验。
- 抑制促炎因子表达：qRT - PCR、Western Blot和ELISA检测表明，DHC能剂量依赖性抑制LPS诱导的BV - 2微胶质细胞中促炎因子释放。
- 减轻神经炎症：MCAO小鼠模型显示，DHC降低半影区组织中促炎因子mRNA和蛋白水平，逆转微胶质细胞活化形态，抑制M1型微胶质细胞活化。
- 改善脑损伤：TTC染色和行为测试显示，DHC减少梗死体积，改善小鼠运动和平衡能力。
- 作用机制：转录组测序和KEGG分析显示目标蛋白富集在TNF信号通路，DHC下调相关蛋白表达。预测CYP2A6是DHC靶点，分子对接显示二者形成稳定复合物，CYP2A6抑制剂效果与DHC相当。
总结展望
本研究首次揭示DHC通过靶向CYP2A6抑制神经炎症，多维度验证其抗炎作用。但DHC最佳剂量和作用机制待明确，药物毒性和代谢研究不足，需评估长期恢复效果，进行体内敲低实验。