Attachment and replication of clade 2.3.4.4b influenza A (H5N1) viruses in human respiratory epithelium: an in-vitro study.
研究背景
高致病性禽流感H5N1病毒自1997年被发现以来致超950例人类感染，死亡率超50%。近年，H5N1 clade 2.3.4.4b病毒传播广泛且跨物种感染。但对其在人类呼吸道的感染机制了解甚少。本研究旨在评估其在人类呼吸道上皮细胞的附着、复制能力及免疫反应特征。
方法速览
采用体外实验模型，含病毒组织化学、原代呼吸道上皮培养、聚合酶活性检测和免疫荧光/组化分析。用三种clade 2.3.4.4b H5N1病毒、一种clade 2.1.3.2 H5N1病毒和季节性H3N2病毒作对照。
主要发现
- 关键氨基酸变异：clade 2.3.4.4b病毒在血凝素受体结合位点有多个关键氨基酸变化，可能增强对人类呼吸道适应性。
- 附着能力增强：该病毒在人类上、下呼吸道附着能力显著高于H5N12005病毒，组织嗜性更广泛。
- 复制效率更高：在人类鼻腔和气管支气管上皮中能有效复制，H5N1Gull2022在气管支气管上皮复制滴度与季节性H3N2相当，且高于H5N12005。
- 聚合酶活性与复制无关：H5N1Gull2022聚合酶活性与H5N12005无显著差异，低于H3N2，复制效率提高非聚合酶活性增强所致。
- 免疫反应更广泛：H5N1Gull2022诱导更强I型和III型干扰素反应及IFN - γ诱导蛋白10分泌，激活更强抗病毒免疫应答，促炎因子分泌低于H3N2。
总结展望
本研究首次系统评估clade 2.3.4.4b H5N1病毒在人类呼吸道上皮的特征，揭示其更强人类适应潜力，为理解跨物种传播提供依据。但研究有局限，需动物实验进一步验证其致病性和传播性。