Targeted Blockage of Pathological Extracellular Vesicles and Particles From Fibroblast-Like Synoviocytes for Osteoarthritis Relief: Proteomic Analysis and Cellular Effect.
研究背景
骨关节炎（OA）常见且患病率随老龄化上升，当前治疗缺有效疾病修饰药物。滑膜炎症在OA病理进展中作用重要，但分子机制不明。纤维母细胞样滑膜细胞（FLS）分泌的细胞外囊泡和颗粒（EVPs）在OA发病机制中角色关键。本研究旨在探讨FLS衍生EVPs在OA中的作用并提出治疗策略。
方法速览
- 细胞培养：分离培养小鼠原代软骨细胞、FLS、巨噬细胞和间充质干细胞。
- EVPs分离表征：用超速离心法分离，通过透射电镜等表征。
- 蛋白质组学分析：用质谱技术鉴定差异蛋白。
- 动物实验：建OA小鼠模型，评估治疗效果。
- 统计分析：用软件进行t检验和方差分析。
主要发现
- EVPs在OA中增加：OA FLSs在炎症和衰老状态下分泌的EVPs增多，蛋白质谱有差异。
- 不同状态EVPs蛋白质谱不同：炎症和衰老FLS衍生的EVPs在蛋白质数量和组成上差异大，功能多样。
- 破坏细胞稳态：这些EVPs增加软骨细胞衰老标志物表达，促进凋亡，诱导巨噬细胞极化，加剧炎症和软骨退化。
- 阻碍干细胞分化：抑制间充质干细胞软骨分化，增加衰老标志物表达，减少软骨基质合成。
- 治疗效果：构建携带shRNA的腺相关病毒敲低Rab27a表达，减少EVP分泌，减轻软骨退化和滑膜炎症，无系统毒性。
总结展望
本研究首次系统性揭示FLS衍生的EVPs在OA中的多方面作用，开发的靶向Rab27a的AAV9病毒有良好治疗效果和安全性。不过，分子机制、多组学分析及体内EVPs检测等方面还有待进一步研究。