医疗科研新进展 | 菁易科研解读：完整器官分离细胞外囊泡方法大比拼

Comparative Assessment of Whole Organ Tissue Processing Methods for the Isolation of Extracellular Vesicles From Intact Organs.

研究背景

细胞外囊泡（EVs）可传递细胞间信息，能从细胞、组织和体液获取。本研究旨在比较酶解法和新型非酶解自动组织解离（ATD）机器这两种技术，探讨不同解离策略对器官EV谱型及细胞特性的影响。

方法速览

1. 动物模型：用12 - 14周龄雄性KRN C57BL/6J小鼠。
2. 器官处理：心脏穿刺放血后取心脏、肺和肾脏，分别用酶解法和ATD法解离。
3. EV分离：用差速离心法和尺寸排阻色谱法（SEC）分离EVs。
4. EV表征：用NanoFCM、纳米粒子跟踪分析等技术表征EVs。

主要发现

1. 不同器官EV谱型有差异：肾脏大中型EV回收量最高，肺部EV显著较小。
2. 两种方法EV产量不同：酶解法在多数器官中EV产量更高，ATD法处理快但产量低。
3. 解离技术影响EV谱型：酶解法处理的肾脏EV较大，ATD法处理的肺部EV中CD9 + 颗粒数量高。
4. 细胞活力和激活状态有别：酶解法样本细胞活力高，ATD法样本细胞激活程度高。
5. 血小板和免疫细胞激活不同：酶解法样本血小板 - 白细胞聚集体多，ATD法样本血小板激活程度高。

总结展望

本研究首次系统比较两种方法在不同器官提取EVs的效果，提供了EV谱型和细胞活力数据。但研究用小鼠模型可能有物种差异，ATD法处理或引入机械应力。未来需优化ATD法参数，提高其适用性。