Delivery of Itgb1-siRNA by triptolide-modified and anti-Flt1 peptide-guided ionizable cationic LNPs for targeted therapy of corneal neovascularization.
研究背景
角膜新生血管（CoNV）是全球视力下降的主要原因之一。现有的皮质类固醇和抗VEGF药物在治疗CoNV上存在长期疗效和副作用的局限。本研究致力于开发一种无创且有效的新疗法，即使用负载Itgb1 - siRNA、经抗Flt1肽和雷公藤内酯（TPL）修饰的可离子化阳离子脂质纳米粒（icLNPs），以提高靶向性并减轻炎症。
方法速览
- 合成与表征Itgb1 - siRNA@TPL，用微流控技术制备icLNPs，并用DLS和TEM表征。
- 进行单细胞RNA测序，分析CoNV和正常角膜细胞类型与基因表达差异。
- 用Lipofectamine 3000将Itgb1 - siRNA转染到细胞中，评估对细胞增殖和迁移的影响。
- 建立CoNV小鼠模型，评估Itgb1 - siRNA@TPL治疗效果。
- 评估生物安全性和细胞毒性。
- 分析信号通路。
主要发现
- 抑制CoNV发展：在小鼠模型中，Itgb1 - siRNA@TPL有效抑制CoNV发展，新生血管长度和面积显著低于对照组。
- 抑制血管内皮细胞（VECs）迁移和分裂：体外实验显示，Itgb1 - siRNA@TPL能抑制VECs迁移和分裂。
- 抑制信号通路激活：Itgb1 - siRNA@TPL抑制PI3K/AKT和NF - κB信号通路的磷酸化。
- 良好的生物安全性和低细胞毒性：在一定浓度下对细胞无显著毒性，长期使用未观察到明显异常。
- 角膜组织局部积累：给药后主要在角膜上皮和基质积累，血浆浓度极低。
总结展望
Itgb1 - siRNA@TPL是治疗CoNV的有效安全方法，不仅通过基因沉默，还调节关键信号通路发挥作用。不过，TPL最佳浓度、临床转化及长期炎症影响仍需进一步研究。