Plasma Microbial Cell‑free DNA Metagenomic Sequencing for Diagnosis of Invasive Fungal Diseases Among High‑risk Outpatient and Inpatient Immunocompromised Hosts.
研究背景
侵袭性真菌病（IFD）是免疫功能低下患者的严重临床问题，现有诊断流程耗时且多为侵入性操作，临床亟需微创、高效的新型诊断工具。本研究旨在评估微生物细胞游离DNA（mcfDNA）宏基因组测序用于IFD诊断的有效性。
方法速览
本研究采用病例对照设计，纳入65例确诊/疑似IFD的高风险免疫低下成人患者（含造血干细胞移植、实体器官移植、血液恶性肿瘤强化化疗人群）及65例对照，采用留存血浆标本开展mcfDNA宏基因组测序，评估其诊断性能。
核心结果
整体诊断效能：mcfDNA测序诊断IFD的整体敏感性为47.7%，特异性达100%。
亚组差异显著：确诊IFD人群中测序敏感性为60.0%，高于疑似人群的37.1%；对侵袭性毛霉病的敏感性达100%，但对侵袭性曲霉病的敏感性仅为45.7%，推测与不同病原体入血的DNA浓度差异有关。
与常规诊断互补：可检出16.9%常规诊断方法漏检的真菌病原体，但也有58%常规方法检出的真菌未被mcfDNA测序识别。
优缺分析
创新性
1.非侵入性采样，可减少患者痛苦，提升诊断效率；
2.特异性达100%，可减少误诊与不必要的抗真菌治疗；
3.对侵袭性毛霉病检测敏感性极高，为这类难治性疾病的早期干预提供可能。局限性
4.样本量较小，尤其是毛霉病仅7例，结果普适性受限；
5.部分标本采集与确诊存在时间延迟，可能影响检测性能；
6.单中心回顾性研究设计，限制了与常规诊断方法的直接对比。
总结展望
mcfDNA测序可作为IFD的辅助诊断工具，尤其适合毛霉病的早期排查，后续需扩大样本量、优化检测技术进一步提升其敏感性，更好服务临床。