医疗科研新突破 | 菁易科研解析：纳米PROTAC如何攻克前列腺癌耐药难题？

In vivo self-assembled nano-PROTAC for the dual degradation of AR and HSP90 to overcome castration-resistant prostate cancer resistance.

研究背景

去势抵抗性前列腺癌（CRPC）对第二代雄激素靶向疗法存在耐药问题，临床治疗面临挑战。本文基于体内自组装纳米技术，设计PSMA靶向的nano - PROTAC，旨在评估其克服CRPC耐药性的潜力。

方法速览

1. 设计与验证：模块化设计nano - PROTAC，含PSMA靶向配体、自组装肽、AR结合基团和E3连接酶配体。
2. 细胞评估：用共聚焦激光扫描显微镜和扫描电子显微镜评估细胞内化和分布。
3. 蛋白分析：通过Western Blot和免疫荧光分析AR和HSP90降解情况。
4. 体内实验：在荷瘤小鼠模型评估生物分布和抗肿瘤效果。

主要发现

1. 高效降解蛋白：在22Rv1细胞模型中，nano - PROTAC能降解80%的AR蛋白、65%的HSP90蛋白和74%的AR剪接变异体AR - V7蛋白，抑制CRPC细胞生长。
2. 体内疗效显著：恩杂鲁胺耐药的异种移植肿瘤小鼠模型中，nano - PROTAC治疗组肿瘤生长抑制值达78%，中位生存期延长15天。
3. 剂量依赖与持续效应：nano - PROTAC在22Rv1细胞中呈浓度依赖性降解AR蛋白，40 μM时达80%降解率，96小时内维持超99%蛋白敲低率。
4. 选择性和特异性好：PSMA敲低的22Rv1细胞中，nano - PROTAC脱靶效应小，目标特异性优越。
5. 高效降解AR - V7：降解AR - V7效率比P - AR高66%，机制可能是抑制HSP90促进AR - V7泛素化清除。
6. 细胞毒性低：在PSMA低表达的正常RWPE - 1细胞中细胞毒性可忽略，细胞活力超90%。
7. 肿瘤积累佳：荷瘤小鼠模型中，nano - PROTAC 2小时内肿瘤选择性积累，24小时内残留信号78%，优于传统PROTAC。
8. 抗肿瘤效果好：22Rv1异种移植肿瘤模型中，肿瘤体积抑制率65%，中位生存期48天，优于对照组。

总结展望

nano - PROTAC通过多靶点降解、自组装纳米结构和精准选择性，有效克服CRPC耐药性。不过，目前研究主要针对PSMA阳性和AR阳性的CRPC，长期安全性也需进一步评估。