Imaging mass cytometry reveals the order of events in the pathogenesis of immune-mediated aplastic anemia.
研究背景
免疫介导的再生障碍性贫血（AA）由自身免疫反应破坏造血干细胞和祖细胞（HSPC）导致。目前，免疫细胞间相互作用、与微环境互动及AA发展时间顺序不明。本研究用成像质谱流式细胞术（IMC）分析AA患者骨髓活检样本，以阐明AA发展机制。
方法速览
- 样本：收集16名AA患者诊断时骨髓活检样本，12名患者IST治疗6个月后再次采样，另取6名对照组样本。
- 技术：用IMC对样本多标记染色，生成高维图像，经细胞分割和聚类分析识别细胞亚群及空间分布。
- 分析：通过optSNE和细胞邻域分析确定细胞亚群空间分布和相互作用模式。
主要发现
- 免疫热点区域：AA患者骨髓存在淋巴细胞主导的“免疫热点”，富含促炎性淋巴细胞，激活的巨噬细胞与祖细胞密切接触，可能是HSPC破坏主要发生地。
- 淋巴细胞主导热点：Ki - 67 +区域有大量具促炎性表型的T、ILC和B细胞，支持其在AA发病早期免疫激活中的重要作用。
- 巨噬细胞富集热点：Ki - 67 +区域还有激活的CD68 - CD163 + CD4 +巨噬细胞，呈增大状态并吞噬造血细胞，可能在免疫反应高峰时起关键作用。
- 分化效应细胞残留：HSPC耗竭骨髓区域有终末分化的CD8 + T细胞和浆细胞，反映免疫反应晚期阶段。
- 免疫热点与治疗效果：IST治疗6个月后，多数患者免疫热点显著减少，骨髓恢复正常者更明显，表明免疫热点在AA病理过程中起关键作用。
总结展望
本研究首次用IMC揭示AA免疫细胞空间分布和相互作用，提出AA发展时间顺序。但研究局限于骨髓活检样本，未全面评估全身免疫反应，也未涉及免疫细胞具体靶点和机制，需体外实验进一步验证。