医疗科研新发现 | 菁易科研解读：LRRC8A与缺血性卒中血脑屏障完整性的关联

LRRC8A in endothelial cells contributes to the aberrant blood-brain barrier integrity in ischaemic stroke.

研究背景

脑卒中后血脑屏障（BBB）通透性增加是高死亡率的关键因素之一，调节BBB完整性机制不明。Leucine - rich repeat - containing 8A (LRRC8A) 对细胞体积稳态重要，但对BBB功能影响未知。

方法速览

1. 建立短暂大脑中动脉闭塞（MCAO）模型监测皮层血流。
2. 用原代小鼠和人脑微血管内皮细胞进行缺氧葡萄糖剥夺（OGD）和再氧合处理。
3. 通过膜片钳记录体积调节氯离子电流。
4. 用免疫染色评估蛋白质表达。
5. 用Transwell实验评估细胞通透性。
6. 用荧光成像检测Evans blue（EB）泄漏和梗死体积。

主要发现

1. 内皮细胞特异性敲除LRRC8A减轻脑损伤：改善神经学评分，减少梗死面积和BBB泄漏，减少微胶质细胞炎症反应。
2. 缺血后内皮细胞中LRRC8A表达上调：缺血再灌注后LRRC8A的mRNA水平升高，紧密连接蛋白mRNA水平下降。
3. 缺氧葡萄糖剥夺暴露增强LRRC8A通道功能：OGD增强VRCC电流密度，LRRC8A特异性siRNA敲低可抑制该效应。
4. 敲低LRRC8A改善内皮细胞间的紧密连接：增加紧密连接蛋白ZO - 1和VE - cadherin表达。
5. 敲低LRRC8A减轻OGD/R诱导的BBB通透性：降低FITC - dextran的通透性。
6. WNK1介导LRRC8A对紧密连接蛋白表达的调节：WNK1抑制剂和激动剂影响紧密连接蛋白表达，体内实验证实WNK1在BBB损伤中起重要作用。
7. LRRC8A通道抑制剂Eupatorin保护BBB完整性并减少梗死面积：降低EB在脑实质中的含量，减少梗死体积。

总结展望

本研究首次揭示LRRC8A在内皮细胞中对BBB完整性的调节作用，发现WNK1的关键作用，识别了Eupatorin的潜在治疗价值。但研究主要基于体外和动物模型，临床应用待验证，LRRC8A和WNK1具体信号通路机制需深入研究。