Conformation-sensitive targeting of CD18 depletes M2-like tumor-associated macrophages resulting in inhibition of solid tumor progression.
研究背景
肿瘤微环境在实体瘤进展中发挥关键作用，M2型肿瘤相关巨噬细胞（M2-TAMs）会构建免疫抑制微环境，促进肿瘤生长。但由于缺乏特异性生物标志物，M2-TAMs的靶向治疗面临诸多挑战。本研究旨在明确肽-药物偶联物TB511对M2-TAMs的抗肿瘤效果，阐明其作用机制。
方法速览
本研究采用LC-MS/MS鉴定TB511的靶蛋白，通过表面等离子共振（SPR）分析多肽与靶蛋白不同结构域的结合亲和力，结合免疫荧光染色、流式细胞术分析靶蛋白表达特征；在结直肠癌、非小细胞肺癌、胰腺导管腺癌小鼠模型及人源化小鼠模型中评估抗肿瘤效果，通过单颗粒追踪成像解析TB511的胞内转运过程。
核心研究发现
- 活化CD18是M2-TAMs的特异性靶点
研究证实活化CD18在人肿瘤组织中表达显著高于正常组织，且特异性高表达于M2-TAMs，其表达与M2巨噬细胞标志物MRC1显著相关，可作为M2-TAMs的特异性治疗靶点。
- TB511高特异性结合活化CD18
TB511携带的TAMpep肽可特异性结合活化CD18的半胱氨酸丰富区，结合常数KD可达0.185 nM，亲和力远高于CD18的其他结构域，具备精准靶向M2-TAMs的能力。
- TB511特异性诱导M2-TAMs凋亡
TB511可快速激活M2-TAMs中的caspase 3/7，诱导细胞凋亡，该作用对M0、M1巨噬细胞无明显影响；敲除或阻断CD18后，TB511的凋亡诱导能力显著下降，证实CD18是其核心作用靶点。
- TB511在体内发挥显著抗肿瘤作用
在多种荷瘤小鼠模型及人源化小鼠模型中，TB511均可显著抑制实体瘤生长，减少肿瘤组织中M2-TAMs数量，增加CD8+T细胞、NK细胞的浸润，通过重编程肿瘤微环境增强机体抗肿瘤免疫反应。
- 阐明TB511的胞内转运机制
TB511主要通过网格蛋白介导的内吞和巨胞饮作用进入M2巨噬细胞，随后在dKLA肽的促进下完成内体逃逸进入细胞质发挥作用，内体逃逸是TB511诱导凋亡的必要条件。
总结与展望
本研究首次鉴定活化CD18为M2-TAMs的特异性靶点，明确了肽-药物偶联物TB511靶向杀伤M2-TAMs的分子机制，在多种实体瘤模型及人源化模型中验证了抗肿瘤效果，为实体瘤免疫治疗提供了新的方向。
目前研究仍存在一定局限性：仅在三种实体瘤模型中验证效果，尚未覆盖更多肿瘤类型；内体逃逸的具体机制仍需进一步探索，且尚无临床试验数据，有待后续研究推进。